用CO2振蕩培養(yǎng)箱振蕩培養(yǎng)真菌會(huì)出現(xiàn)哪些問(wèn)題?
發(fā)表時(shí)間:2020-01-16 14:03:52 瀏覽次數(shù):1807
Q1:實(shí)驗(yàn)操作文獻(xiàn)上是搖7d,若有事耽擱了,CO2振蕩培養(yǎng)箱多搖了幾天會(huì)有什么問(wèn)題?
A1:文獻(xiàn)中培養(yǎng)7天一般是具體培養(yǎng)條件下產(chǎn)量的平臺(tái)期,根據(jù)菌的生長(zhǎng)情況確定的,或者可以說(shuō)7天的時(shí)候產(chǎn)物量較高,建議在確定條件的情況下做一個(gè)動(dòng)態(tài)或者半動(dòng)態(tài)產(chǎn)量以及細(xì)胞量分析,找到對(duì)數(shù)期以及平臺(tái)期,便知道哪天結(jié)束發(fā)酵比較合適。
Q2:不知道哪種方法做活性成分分析?
A2:活性成分分析方面,首先要確定活性物質(zhì)是胞內(nèi)還是胞外,建議分開(kāi),取樣之后離心將上清和細(xì)胞分別處理,上清用各種溶劑萃取,細(xì)胞超聲破碎或者低溫烘干后研磨后,溶劑萃取,初期做的話建議先簡(jiǎn)單萃取直接HPLC-MS來(lái)鑒定物質(zhì),后期需要大量純品時(shí)在濃縮,柱子之類的分離。可以看CO2振蕩培養(yǎng)箱相關(guān)文獻(xiàn)總結(jié)。
Q3、參數(shù)(時(shí)間、溫度、轉(zhuǎn)速)是如何確定的?
A3:CO2振蕩培養(yǎng)箱培養(yǎng)真菌的條件這個(gè)可以采取單因素或者做一個(gè)PB設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單搞定,也可根據(jù)文獻(xiàn)先有一個(gè)大概的培養(yǎng)條件。然后自己再進(jìn)行更進(jìn)一步的優(yōu)化。